A Microscopia de Fluorescência é uma das técnicas mais consolidadas para identificar MPs no solo, e apresenta um grande potencial para confirmar a presença dos plásticos.
A MF é uma variação da microscopia por luz ultravioleta que permite visualizar materiais capazes de emitir fluorescência quando excitados por radiação de um comprimento de onda específico. Tradicionalmente aplicada na biologia celular, essa tecnologia também se tornou fundamental para a identificação de microplásticos em solos. Quando expostas à radiação ultravioleta, muitas partículas plásticas entram em estado excitado e passam a emitir luz em comprimentos de onda maiores, produzindo imagens de alto contraste que facilitam sua detecção e diferenciação em meio à matriz do solo.
Antes da aplicação da microscopia são utilizadas técnicas de pré-tratamento para evitar qualquer contaminação cruzada, ou presença de materiais que possam causar algum viés ao estudo. Nesse sentido uma das técnicas que são utilizadas para este processo é a separação por densidade, como mostra a figura abaixo, que utiliza de soluções salinas (como, NaCl, ZnCl2, entre outras)para isolar os microplásticos do solo e em seguida ocorre um processo de filtração para reduzir a presença de água considerando que está é um dos elementos que mais prejudica a reflexão da luz.
Para auxílio e melhor visualização pela MF são aplicados corantes como o Vermelho do Nilo (Nilo Red), que após aplicado em amostras com presença de plástico e expostas a luz ultra-violeta (UV) sua interação torna os plásticos fluorescentes, e em seguida são analisadas as amostras sob um microscópio óptico, no qual acoplado a ele está uma câmera de luz UV, que por sua vez, permitirá visualizar a imagem em uma tela acoplada ao microscópio.
Essa técnica desempenha um papel essencial na identificação e no estudo de MPs em solos, devido à sua elevada taxa de acerto e alta reprodutibilidade. Além disso, apresenta grande potencial para atuar como método complementar às técnicas de sensoriamento próximo, possibilitando, em conjunto, o desenvolvimento de modelos e abordagens capazes de prever com alta confiabilidade a presença de MPs em diferentes tipos de solo.
